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CRISPR-Cas9

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Alt-R CRISPR-Cas9系統

Cas9核酸內切酶需要CRISPR RNA(crRNA)來指定靶序列,crRNA和反式激活crRNA(tracrRNA)結合先形成指引RNA(gRNA),隨后與核酸內切酶構成有編輯功能的核糖核蛋白復合物,即(Ribonucleoprotein complex,RNP).靶序列DNA切割后,通過非同源末端連接(Non-homologous end-joining,NHEJ)或同源重組(Homology directed recombination,HDR)修復從而產生序列變異。 Alt-R CRISPR-Cas9系列產品為基因編輯研究提供了簡單優化且使用方便的工具。

產品標題

Alt-R CRISPR-Cas9系統

產品簡介

向導RNA · CRISPR guide RNAs

CRISPR核酸內切酶 · CRISPR endonuclease  

對照試劑盒 · Control kits

CRISPR電轉增強劑 · CRISPR Electroporation Enhancer

產品詳情

簡單實驗流程,節約時間和成本

  •            1小時3步組裝具有編輯功能的Alt-R RNP
  •            多種方式導入Alt-R RNP
  •            提供針對不同模式生物的實驗方法
  •            Alt-R RNP可在體外對DNA進行編輯

優化的gRNA —Alt-R crRNA : tracrRNA復合體

  •           crRNA: tracrRNA 優化長度明顯改善編輯效率
  •           特殊修飾crRNA:tracrRNA 增加核酸酶抗性降低免疫反應
  •           多物種在線crRNA預設計數據庫及檢查器

千挑萬選”高保真Cas9酶 —Alt-R S.P. HIFI Cas9

  •           對目標位點較高的編輯效率
  •           基因編輯脫靶效應大幅度降低
  •           與gRNA復合體形成RNP,細胞毒性低,不易引起免疫反應

  

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下載資料

操作指南

1.利用Alt-R CRISPR-Cas9系統與Ultramer Oligo進行同源重組 (HDR)的操作指南 (下載請點擊)

2. 非同源末端連接(NHEJ)的方法:

   Alt-R CRISPR-Cas 9 system-RNP脂質體轉染操作指南(推薦)(下載請點擊)

   Alt-R CRISPR-Cas 9 system-RNP 電轉-Amaxa Nucleofector system (下載請點擊)

   Alt-R CRISPR-Cas 9 system-RNP 電轉- Neon Transfection system (下載請點擊)

   Alt-R CRISPR-Cas 9 system-RNP 電轉-  Gene Pulser Xcell system (下載請點擊)

3. Alt-R CRISPR-Cas 9 system-RNP體外切割DNA操作指南。(下載請點擊)

4. Alt-R CRISPR-Cas 9 system-質粒與引導RNAs轉染操作指南 (下載請點擊)

使用者總結的方法:

1.CRISPR-Cas9 RNP 轉染-B.tryoni 顯微注射-A Choo (下載請點擊

2.CRISPR-Cas9 RNP 轉染-線蟲-A Dernburg (下載請點擊

3. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-CD34+造血干和祖細胞-A Hendel (下載請點擊)

4. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-人造干細胞-K Moore (下載請點擊

5. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-誘導性多能干細胞電轉-NepaGene (下載請點擊)

6. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-小鼠受精卵電轉-NepaGene (下載請點擊)

7. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-小鼠受精卵電轉-Takemoto (下載請點擊)

8. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-小鼠顯微注射-CB Gutumurthy (下載請點擊)

9. CRISPR-Cas9 RNP 轉染-斑馬魚胚胎-J Essner(下載請點擊)

應用案例

   運用Alt-R CRISPR-Cas 9 System提高同源重組效率(下載請點擊)

   關于Cas9 nickases在基因編輯中的運用(下載請點擊

   關于Alt-R CRISPR Cas 9 ATTO 550熒光素修飾 tracr RNA-應用運用 (下載請點擊)

產品資料

   Alt -R CRISPR-Cas 9 與 Alt-R CRISPR-Cas12a簡要說明 (下載請點擊)

   Alt-R CRISPR-Cas 9 基因編輯系統 (下載請點擊)

   Alt-R S.p. HiFi Cas9 Nuclease 3NLS高保真Cas9蛋白 (下載請點擊)

海報

1.利用IDT gBlock基因片段和CRISPR-Cas9基因編輯工具在組織細胞中進行基因敲除

  Optimized methods for gene disruption using CRISPR-Cas9 editing in cell culture with IDT gBlocks Gene Fragments (下載請點擊)

2.ATTO? 550 labeled Alt-R? Cas9 tracrRNA 幫助熒光激活細胞分類及細胞內的RNP復合物可視化 

ATTO 550 labeled Alt-R Cas9 tracrRNA allows for FACS sorting and intracellular RNP-complex visualization (下載請點擊

3.利用carrier DNA提高電轉CIRSPR-Cas9 RNPs的基因編輯效率

Improved genome editing efficiency using carrier DNA in electroporation of CRISPR-Cas9 RNPs (下載請點擊)

4.由CRISPR介導的利用單鏈DNA模板進行有效的同源重組修復

   Efficient homology-directed repair using single-stranded DNA templates (下載請點擊)

5.新型Cas9蛋白在保持高中靶編輯能力同時有效減低脫靶率

   A novel Cas9 mutant confers reduced off-target gene editing while maintaining on-target potency (下載請點擊)

6.CRISPR系統優化的引導RNA 

  Alt-R RNAs optimized for CRISPR (下載請點擊)

安全數據說明(SDSs

HDR-Enhancer (下載請點擊)

Alt-R CRISPR nucleases and nickases (下載請點擊)


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    由于天然的tracrRNA較長(含有89個堿基),合成時不僅復雜而且費用高。因此IDT考慮將tracrRNA縮短,同時考察crRNA與tracerRNA在不同長度時的編輯效率。結果表明36個堿基crRNA與67個堿基tracrRNA組合時效率高。同時,67個堿基的tracrRNA與89個堿基相比成本更低,因此降低了客戶的使用成本。此外,還可以通過化學修飾使其具有核酸酶抗性。

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